液相色譜儀氨基柱的使用

氨基柱簡介

　　氨基柱，全稱氨丙基鍵合硅膠色譜柱，色譜柱家族中最靈活的色譜柱，不僅可以用于正反相還可以應(yīng)用于離子交換（弱陰離子交換柱）中。

　　氨基柱的鍵合官能團(tuán)氨丙基要比C18,C8柱的鍵合官能團(tuán)更容易水解，特別是當(dāng)你的使用條件是反相條件下時(shí)，要特別注意控制pH值范圍，pH值越低越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)；

　　液相色譜儀流動(dòng)相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)（建議水比例不超過40%）。

　　提示：在使用后以及準(zhǔn)備長時(shí)間放置該柱時(shí)，必要的清洗和將氨基柱保存于純的有機(jī)溶劑中是很好的保養(yǎng)措施。

氨基柱的活化

　　對(duì)于新氨基柱，首先應(yīng)詳細(xì)閱讀液相色譜儀使用說明書，了解柱子出廠保存溶劑。一般出廠會(huì)保存在正相溶劑中，如果保存溶劑與你將要使用的流動(dòng)相極性不同不互溶，請(qǐng)先用異丙醇過渡。過渡過程中應(yīng)注意異丙醇粘度較大，會(huì)導(dǎo)致柱壓很高，應(yīng)使用小流速過渡。

　　當(dāng)使用反相模式時(shí)，用前請(qǐng)使用異丙醇小流速過夜平衡色譜柱。流速建議0.1-0.2mL/min,之后再轉(zhuǎn)換到100%乙腈沖洗20柱體積，然后轉(zhuǎn)換到和流動(dòng)相相同比例的不含鹽的乙腈水體系沖洗20柱體積。

　　當(dāng)液相色譜儀使用正相模式時(shí)，如與出廠保存溶劑互溶，可使用流動(dòng)相直接沖洗20倍柱體積；如不互溶請(qǐng)用異丙醇過渡。

氨基柱的沖洗及保存

　　簡單來說，正相條件下使用的氨基柱參照硅膠柱的清洗方法；反相條件下使用的氨基柱參照C18的清洗方法。